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廣譜型DNA 免核酸提取試劑應(yīng)用

貨號(hào)：M-DNA01

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒中采用*配方，能夠快速高效的裂解各種常見樣本，無需反復(fù)離心，通過裂解和吸附獲得高質(zhì)量的DNA。該DNA 無需進(jìn)行純化可以直接用于PCR、熒光定量PCR、STR 等擴(kuò)增。DNA Lysis 可用于血樣、唾液、腹水、細(xì)胞、組織（例如淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、肺、肌肉、脊椎、皮膚、尾巴、耳朵等）、拭子（例如血拭子、咽拭子）、DNA 病毒、大腸桿菌、農(nóng)桿菌、葡萄球菌、環(huán)境樣本（例如擦拭物、水樣本、鞋底）、支原體、衣原體以及植物等樣品中基因組DNA 的提取。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

組分M-DNA0101（50T） M-DNA0102（250T）

DNA Lysis 1 mL 5 mL

保存條件 4oC 保存。使用前將DNA Lysis 室溫充分混勻。

需要準(zhǔn)備 金屬恒溫浴、離心機(jī)

使用方法

一、不同樣品的處理方法

1. 組織液的處理

（1）組織液包括組織研磨液、細(xì)胞懸液、血清、血液、唾液、尿液、拭子處理液※等。取10 μL組織液置于離心管中。

※：棉簽放入500μL生理鹽水或無菌水中，浸泡5-10min，用力擠壓后溶液取10 μL置于離心管中。

（2）加入20 μL DNA Lysis。

（3）充分混勻。

（4）置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板。

2. 組織塊的處理

（1）用眼科剪剪取1-2mm 組織塊，并將組織塊剪成肉泥狀。

（2）加入20 μL DNA Lysis。

（3）充分混勻。

（4）置于55oC 加熱5 分鐘。

（5）10000rpm 離心2-3 分鐘，取上清。上清即為DNA 模板。

3. 其他樣本的處理

（1）菌類包括大腸桿菌、農(nóng)桿菌、葡萄球菌等。取20 μL DNA Lysis 放置在離心管中。

（2）用接種針/牙簽挑取菌斑中一部分，放在（1）中溶液中。如果是培養(yǎng)液，取10μL 放在（1）中溶液中。

（3）充分混勻。

（4）置于55oC 加熱5 分鐘。溶液即為DNA 模板。

4. DNA 病毒的處理

（1）細(xì)胞懸液參考“組織液的處理"。

（2）病料組織參考“組織塊的處理"。

5. 植物樣品的處理

（1）參考“組織塊的處理"。

二、推薦PCR 反應(yīng)體系

注意事項(xiàng)

一、試劑盒使用前注意事項(xiàng)

（1）所有試劑應(yīng)按照溫度儲(chǔ)存。請(qǐng)勿反復(fù)凍融。

（2）檢測(cè)前后均需要對(duì)操作區(qū)進(jìn)行消毒，消毒方式可以采用75%乙醇或核酸消除劑等。耗材均

需使用商品化的無酶耗材。

（3）DNA Lysis 采用配方，若出現(xiàn)肉眼可見小球狀物質(zhì)屬于正常現(xiàn)象。

二、試劑盒使用過程中注意事項(xiàng)

（1）PCR 過程中推薦使用陰性對(duì)照和陽性對(duì)照。

（2）整個(gè)過程中使用的吸頭、離心管等耗材應(yīng)丟棄在含有75%乙醇或核酸消除劑的容器中，防止形成環(huán)境污染。

三、試劑盒使用后注意事項(xiàng)

（1）DNA Lysis 處理后的DNA 模板（除血樣）可在-20℃保存至少1 個(gè)月。避免反復(fù)凍融，防止基因組斷裂。

（2）PCR 反應(yīng)完成后，嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)區(qū)開蓋，在污染區(qū)進(jìn)行瓊脂糖電泳，以防止氣溶膠污染。為防止試劑盒污染，請(qǐng)勿將不同批號(hào)試劑盒混用。

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