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NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)在細(xì)菌鑒定中應(yīng)用優(yōu)勢
更新時間:2024-06-24   點擊次數(shù):217次

NuSmart®核酸直接釋放技術(shù)在細(xì)菌鑒定中應(yīng)用優(yōu)勢

細(xì)菌屬于原核生物的一種,雖然結(jié)構(gòu)相對簡單,但是在生物界屬于數(shù)量最多的一類生物。細(xì)菌在生物界扮演著多重角色,既有乳品生產(chǎn)、抗生素生產(chǎn)、廢水處理等積極的一面,也有作為病原菌感染人和牲畜從而導(dǎo)致疾病傳播的危害一面。所以了解和控制細(xì)菌的特征和特性,對日常生產(chǎn)生活至關(guān)重要。

實驗室條件下,細(xì)菌的鑒定主要有培養(yǎng)、生化鑒定、血清學(xué)鑒定等,但是這些方法均費時費力,尤其是細(xì)菌培養(yǎng)。而分子生物學(xué)方法是近年來更多被應(yīng)用的方法,例如PCR技術(shù)。該技術(shù)對不易生長,培養(yǎng)條件復(fù)雜,未知細(xì)菌等表現(xiàn)良好??偨Y(jié)發(fā)現(xiàn)PCR在細(xì)菌中的應(yīng)用包括以下方向:

1、基于16S rDNA基因的快速鑒定;

2、特異性基因的鑒定,例如毒力基因、耐藥基因等;

3、食品微生物檢測;

4、細(xì)菌數(shù)量動態(tài)檢測;

5、常見呼吸道病原菌篩查;

6、細(xì)菌DNA圖譜制作等。

對于實驗室工作人員來說,細(xì)菌難培養(yǎng),細(xì)菌增殖數(shù)量不夠,環(huán)境中細(xì)菌復(fù)雜程度高等難點。而能夠成功培養(yǎng)到目標(biāo)細(xì)菌,且數(shù)量達(dá)標(biāo)是PCR的關(guān)鍵前提。目前實驗室工作人員常用細(xì)菌DNA柱式提取試劑盒進(jìn)行基因組DNA的提取純化。該方法作為經(jīng)典方法長期被使用,但是整個操作過程需要40-90分鐘不等,使用溶菌酶和蛋白酶K等生物活性酶類,多次反復(fù)離心,步驟繁多、使初學(xué)的操作者體驗樂趣嚴(yán)重降低。我司開發(fā)的NuSmart®微生物 PCR 試劑盒che底解決以上痛點問題。優(yōu)點如下:

—對樣本量要求低(1-2uL菌液,1個菌斑)

—操作快速(5分鐘釋放基因組DNA)

—操作簡單

—檢出率達(dá)99.99%

圖片1.png

案例A 對數(shù)生長期細(xì)菌快速擴增16S rDNA

圖片2.png

 

革蘭氏陰性菌:1 大腸桿菌 2 胞曼氏不動桿菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇異變形桿菌 5 銅綠假單胞菌

革蘭氏陽性菌:6 蠟狀芽孢桿菌 7 糞腸球菌 8 肺炎鏈球菌 9 金黃色葡萄球菌 10 假中間葡萄球菌

使用NuSmart®微生物 PCR 試劑盒(貨號Nu-Mi01)處理對數(shù)生長期菌液,2× MIC Smart Mix擴增16S rDNA基因。

 

 

案例B 單菌落快速擴增16S rDNA

 

圖片3.png

 

革蘭氏陰性菌:1 大腸桿菌 2 胞曼氏不動桿菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇異變形桿菌 5 銅綠假單胞菌

革蘭氏陽性菌:6 蠟狀芽孢桿菌 7 糞腸球菌 8 肺炎鏈球菌 9 金黃色葡萄球菌 10 假中間葡萄球菌

使用NuSmart®微生物 PCR 試劑盒(貨號Nu-Mi01)處理菌斑(至于生理鹽水中),2× MIC Smart Mix擴增16S rDNA基因。

 

 

案例C 甘油菌快速擴16S rDNA

圖片4.png

 

革蘭氏陰性菌:1 大腸桿菌 2 胞曼氏不動桿菌 3 肺炎克雷伯菌 4 奇異變形桿菌 5 銅綠假單胞菌

革蘭氏陽性菌:6 蠟狀芽孢桿菌 7 糞腸球菌 8 肺炎鏈球菌 9 金黃色葡萄球菌 10 假中間葡萄球菌

使用NuSmart®微生物 PCR 試劑盒(貨號Nu-Mi01)處理甘油菌,2× MIC Smart Mix擴增16S rDNA基因。

 


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